一、准备培养皿
准备琼脂。 琼脂是一种用于尊龙凯时(中国)人生就是搏! 官网:培养细菌的果冻状物质。 它由一种红藻制成,为许多不同类型的细菌提供了理想的生长表面。某些类型的琼脂含有添加的营养物质(如羊血等),有助于促进更旺盛的细菌生长。
-
本实验中最容易使用的琼脂类型是粉末状的营养琼脂。您将需要多少琼脂,但每 10 厘米(3.9 英寸)培养皿所用的琼脂粉不要少于 1.2 克(½ 茶匙)。
-
在耐热盘或碗中,将 1.2 克(½ 茶匙)营养琼脂粉加入 60 毫升(0.25 摄氏度)热水中。将这些数量乘以您计划使用的尊龙凯时(中国)人生就是搏! 官网:培养皿数量。
-
将碗或盘子放入微波炉中,让它开始沸腾 1 分钟或更长时间,注意确保琼脂溶液不会沸腾溢出。
-
溶液准备好后,琼脂粉应完全溶解,液体颜色澄清。
-
在继续之前让琼脂溶液冷却几分钟。你不想被烧伤!
准备培养皿。 培养皿是由透明玻璃或塑料制成的小型平底容器。 它们有两半 - 顶部和底部 - 相互插入。这可以保护内容物免受任何不需要的污染空气的影响,但也可以让细菌产生的任何气体逸出。
-
培养皿在用于培养细菌前必须彻底灭菌,否则会影响实验结果。新购买的培养皿应预先消毒并密封在塑料包装中。
-
从包装中取出培养皿并将两半分开。非常小心地将温热的琼脂溶液倒入培养皿的下半部分——刚好足以在培养皿底部形成一层。 在有高火焰的蜡烛或本生灯的情况下工作,以保持较低的污染。
-
快速更换培养皿的上半部分,以防止空气中的细菌污染实验。将培养皿放在一边 30 分钟到 2 小时,直到琼脂溶液冷却并变硬(准备就绪后它会像凝固的果冻)。
冷藏培养皿直到可以使用。 如果您不打算立即使用装满琼脂的培养皿,则应将它们存放在冰箱中,直到您准备好继续进行实验。
-
将培养皿存放在冰箱中可防止培养皿中的水分蒸发(细菌需要潮湿的环境才能生长)。它还可以使琼脂表面稍微变硬,从而防止在转移细菌样品时出现任何撕裂或挖痕。
-
将培养皿放入冰箱时,应将培养皿倒置。这有助于防止盖子上的任何冷凝水掉落并破坏生长表面。
-
充满琼脂的培养皿可在冰箱中保存长达几个月。当您准备好使用它们时,将它们从冰箱中取出并让它们达到室温,然后再放入您的样品。
二、生长细菌
将细菌引入培养皿中。 一旦琼脂溶液变硬并且培养皿处于室温,您就可以开始有趣的部分了——引入细菌。有几种方法可以做到这一点——通过直接接触或通过样本采集。
-
直接接触:
这是指细菌通过直接接触转移到培养皿中,即接触琼脂。最常见的方法之一是用指尖(洗手之前或之后)轻轻按压琼脂表面。 但是,您也可以尝试将指甲或旧硬币的表面压入琼脂中,甚至将一小撮头发或一滴牛奶放入培养皿中。 如果有的话,请使用无菌棉签。 动用你的想象力!
-
样品采集
:使用这种方法,您可以从几乎任何表面采集细菌并将其转移到培养皿中,您只需要一些干净的棉签。 只需拿起棉签并在您能想到的任何表面上轻扫 - 嘴巴内部、门把手、计算机键盘上的按键或遥控器的按钮 - 然后用它在表面划线琼脂(不撕裂)。 这些地方藏有大量细菌,应该会在几天内提供一些有趣(和恶心)的结果。
-
如果愿意,您可以在每个培养皿中放置多个细菌样本——您所需要做的就是将培养皿分成象限(四分之一),然后在每个象限中涂抹不同的细菌样本。
-
建议您保留培养皿的一个象限没有细菌样本以用作对照组。这使您可以知道在引入细菌样品之前琼脂是否已被污染。
标记并密封培养皿。 一旦你引入了细菌,你应该盖上培养皿的盖子并用一些封口膜或保鲜膜密封。
-
确保在每个培养皿上标明其所含细菌的来源,否则您将无法分辨哪个是哪个。您可以使用一些胶带和记号笔来完成此操作。
-
作为额外的预防措施,您可以将每个培养皿放入一个带拉链的袋子中。这将提供额外的保护层,防止可能形成的任何有害细菌菌落,但仍允许您查看培养皿中的内容。
将培养皿放在温暖、黑暗的地方。 将培养皿放在温暖、黑暗的地方,让细菌在不受干扰的情况下繁殖数天。 记得将盘子倒置存放,这样细菌的生长就不会受到任何水滴的干扰。
-
细菌生长的理想温度在 70 到 98 华氏度(20-37 摄氏度)之间。如有必要,您可以将培养皿放在凉爽的地方,但细菌的生长速度会慢很多。
-
让细菌发育 4-6 天,因为这将为培养物提供足够的生长时间。一旦细菌开始生长,您可能会注意到盘子里散发出一股气味。
记录你的结果。 几天后,您会发现每个培养皿内都生长着数量惊人的细菌、霉菌和真菌。
-
用笔记本记录你对每道菜内容的观察,或许可以得出关于哪些地方细菌最多的结论。
-
如果愿意,您可以使用毡尖标记在培养皿底部的每个菌落周围画一个圆圈,从而测量细菌菌落的每日生长情况。几天后,您应该在每个盘子的底部都有一系列同心环。 这将帮助您计算和记录数据。
测试抗菌剂的有效性。 这个实验的一个有趣的变化是在培养皿中加入抗菌剂(洗手液、肥皂等)以测试其有效性。
-
将细菌引入培养皿后,用棉签将一小滴洗手液、消毒皂或家用漂白剂滴到细菌样本的中心,然后照常继续实验。
-
随着培养皿中细菌的生长,您应该会在放置抗菌剂的位置周围看到没有细菌生长的环或“光环”。这被称为“杀伤区”(或更准确地说,“抑制区”)。
-
您可以通过比较每个培养皿中杀灭区的大小来衡量不同抗菌剂的有效性。杀灭区越宽,抗菌剂越有效。
三、安全处理细菌
采取适当的安全预防措施。 在您尝试处理您的培养皿之前,您首先需要采取适当的安全预防措施。
-
虽然您培养的大多数细菌都不会造成危害,但大的细菌菌落可能会带来更大的风险 - 因此您需要在使用家用漂白剂处理前杀死它们。
-
戴上橡胶手套保护您的手免受漂白剂的伤害,戴上塑料护目镜保护您的眼睛,并戴上围裙保护您的衣服。
-
用橡胶手套盖住切开的伤口,避免在细菌生长时摄入或吸入细菌。
将漂白剂倒入培养皿中。 打开培养皿,小心地将少量漂白剂倒在细菌菌落上,将培养皿放在水槽上方。 这会破坏细菌。
-
小心不要让任何漂白剂接触您的皮肤,因为它会灼伤。
-
然后将消毒过的培养皿放入自封塑料袋中,并将袋子丢进垃圾桶。